Aktivitas Ekstrak N-Heksana Dan Fraksi Hasil Pemisahan Daun Marsilea Crenata Presl. Terhadap Diferensiasi Sel Preosteoblas MC3T3-E1 Melalui Pengukuran Alkaline Phosphatase In Vitro

Ma'arif, Burhan., Agil, Mangestuti and Laswati, Hening (2021) Aktivitas Ekstrak N-Heksana Dan Fraksi Hasil Pemisahan Daun Marsilea Crenata Presl. Terhadap Diferensiasi Sel Preosteoblas MC3T3-E1 Melalui Pengukuran Alkaline Phosphatase In Vitro. EC00202122122.

Text sertifikat_EC00202122122 _tesis Dr.apt.Burhan.pdf Download (2MB)

Abstract

Peningkatan jumlah wanita pascamenopause di seluruh dunia membuat lebih banyak wanita rentan mengalami berbagai penyakit akibat defisiensi estrogen, salah satunya adalah osteoporosis. Pemberian hormone replacement therapy (HRT) sebagai pengganti estrogen diketahui dapat menimbulkan efek samping pada pemakaian jangka panjang, oleh karena itu muncul fitoestrogen sebagai alternatif pengganti estrogen yang potensial dengan efek samping relatif kecil.
Semanggi (Marsilea crenata Presl.) yang terkenal di Surabaya Jawa Timur sebagai salah satu makanan khas, merupakan tanaman yang diduga mengandung senyawa golongan fitoestrogen. Penelitian dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui apakah senyawa kandungan daun M. crenata berpotensi meningkatkan pembentukan tulang pada uji in vitro terhadap sel preosteoblas MC3T3-E1 dengan metode immunocytochemistry (ICC).
Serbuk kering daun M. crenata sebanyak 1,5 kg dimaserasi dengan n-heksana sebanyak 24 L hingga didapatkan ekstrak lengket berwarna coklat kehitaman seberat 12 g. Profil KLT ekstrak n-heksana daun M. crenata menunjukkan adanya kandungan senyawa golongan terpenoid pada penampak noda anisaldehid H2SO4. Ekstrak n-heksana sebanyak 3,5 g kemudian dipisahkan menggunakan kromatografi cair vakum dan didapatkan empat kelompok fraksi hasil penggabungan fraksi-fraksi berdasarkan kemiripan Rf noda.
Ekstrak n-heksana dan fraksi hasil pemisahan daun M. crenata dianalisis dengan GC-MS untuk identifikasi kandungan senyawa. Hasil identifikasi menunjukkan ekstrak n-heksana dan fraksi hasil pemisahan daun M. crenata mengandung senyawa golongan terpenoid (monoterpenoid dan diterpenoid) serta asam lemak dalam bentuk bebas. Secara umum senyawa kandungan daun M. crenata memiliki aktivitas sebagai antioksidan, antikanker dan antiinflamasi.
Studi in silico juga dilakukan terhadap senyawa kandungan daun M. crenata hasil analisis GC-MS untuk melihat afinitas senyawa-senyawa tersebut terhadap reseptor estrogen beta (ERβ). Nilai afinitas yang didapat dibandingkan dengan nilai afinitas 17β-estradiol. Hasil studi in silico menunjukkan nilai afinitas senyawa kandungan daun M. crenata ada yang melebihi afinitas 17β-estradiol, dan ada juga yang dibawah afinitas 17β-estradiol.
Ekstrak n-heksana daun M. crenata diuji secara in vitro dengan terlebih dahulu dibuat menjadi beberapa dosis dalam larutan DMSO 0,5%, untuk kemudian diuji dengan metode ICC pada sel preosteoblas MC3T3-E1 dan diamati dibawah CLSM. Hasil uji in vitro ekstrak n-heksana daun M. crenata menunjukkan adanya peningkatan ALP pada semua dosis dengan efek non monotonic response.
Uji in vitro keempat fraksi dilakukan pada dosis 25 ppm untuk masing-masing fraksi dengan prosedur yang sama dengan uji in vitro ekstrak n-heksana. Hasil uji in vitro fraksi menunjukkan peningkatan aktivitas ALP pada pemberian fraksi 2 dan fraksi 4, sekaligus penurunan aktivitas ALP dibawah kontrol negatif pada pemberian fraksi 1 dan fraksi 3.
Melalui analisis korelasi hasil uji in vitro, TIC GC-MS dan hasil studi in silico, disimpulkan asam palmitat merupakan estrogen like substance didalam daun M. crenata yang berperan dalam pembentukan tulang dengan mekanisme peningkatan runx-2 dan osx pada sel preosteoblas MC3T3-E1. Pada TIC GC-MS menunjukkan asam palmitat merupakan senyawa dengan kadar paling tinggi pada ekstrak n-heksana, fraksi 2 dan fraksi 4 daun M. crenata, sedangkan hasil studi in silico asam palmitat menunjukkan rerank score asam palmitat mendekati rerank score 17β-estradiol.

Item Type:	Hak Cipta
Subjects:	11 MEDICAL AND HEALTH SCIENCES > 1115 Pharmacology and Pharmaceutical Sciences
Divisions:	Faculty of Medical and Health Sciences > Department of Pharmacy
Depositing User:	Burhan Ma'arif
Date Deposited:	16 Nov 2021 07:39

Downloads

Origin of downloads

Actions (login required)

View Item